Razlika med centrifugiranjem z diferencialnim in gostoto gradientom - Razlika Med

Razlika med centrifugiranjem z diferencialnim in gostoto gradientom

Glavna razlika - Diferencialno proti gradientu gostote

Centrifugiranje je metoda ločevanja, pri kateri rotacija vzorca okoli fiksne osi povzroči centrifugalno (g) silo. Delci ali celice v vzorcu se centrifugalno sili navzdol skozi tekoči medij. Hitrost sedimentacije je določena z gostoto in velikostjo delcev ali celic. Ker se sedimentacija delcev ali celic z različnimi gostotami in velikostmi pojavlja v različnih stopnjah, so fizično ločeni drug od drugega na neki točki centrifugiranja. Diferencialno centrifugiranje in centrifugiranje z gradientom gostote sta dve glavni vrsti centrifugiranja. The glavna razlika med diferencialnim in centrifugiranjem z gradientom gostote je to frakcioniranje se izvede na podlagi velikosti v diferencialnem centrifugiranju, medtem ko se frakcioniranje opravi na podlagi gostote v centrifugaciji z gradientom gostote.

Pokrita ključna območja

1. Kaj je diferencialno centrifugiranje
- Definicija, dejstva, proces
2. Kaj je centrifugiranje z gradientom gostote
- Definicija, dejstva, proces
3. Kakšne so podobnosti med diferencialnim in gostoto gradientnim centrifugiranjem
- oris skupnih funkcij
4. Kakšna je razlika med centrifugiranjem diferencialnega in gostotnega gradienta
    - Primerjava ključnih razlik

Ključni pojmi: gostota, centrifugiranje z gradientom gostote, diferencialno centrifugiranje, diferencialno peletiranje, ravnotežno centrifugiranje, izopikonsko centrifugiranje, centrifugiranje za območno območje, velikost


Kaj je diferencialno centrifugiranje

Diferencialno centrifugiranje se nanaša na najpreprostejšo obliko centrifugiranja. Znan je tudi kot diferencialno peletiranje. Komponente celice lahko ločimo z diferencialnim centrifugiranjem. Diferencialno centrifugiranje temelji na velikosti delcev v raztopini. Tako se delci z različnimi velikostmi usedajo z različnimi hitrostmi med centrifugiranjem. Večji delci se usedajo hitreje kot manjši delci. Hitrost sedimentacije se lahko poveča s povečanjem centrifugalne sile. Diferencialno centrifugiranje je prikazano v slika 1.


Slika 1: Diferencialno centrifugiranje

V idealnem primeru se diferencialno centrifugiranje uporablja za pridobivanje celic ali za proizvodnjo surovih podceličnih frakcij iz homogenata tkiva. Na primer, jetrni homogenat lahko vsebuje jedra, mitohondrije, lizosome in membranske mehurčke. Ko se jetrni homogenat kratek čas centrifugira pri nizki hitrosti, se v peleti usede velika jedra. Pri višji centrifugalni sili se uporabljajo mitohondrije tudi usedline v peleti. Zaradi homogenosti bioloških vzorcev se sedimentacija vedno kontaminira.

Kaj je centrifugiranje z gradientom gostote

Centrifugiranje z gradientom gostote se nanaša na metodo ločevanja, pri kateri se snovi koncentrirajo v raztopinah cezijevih soli ali saharoze. Sodeluje pri frakcioniranju delcev na podlagi gostote plovnosti. Cezijeve soli ali raztopina saharoze se imenujejo gradient gostote. Dve vrsti centrifugiranja z gradientom po gostoti sta centrifugiranje s hitrostno cono in izopikonsko centrifugiranje.

Stopenjsko-območno centrifugiranje

Med centrifugiranjem z območno hitrostjo se vzorec nanese kot ozko območje na vrh gradienta gostote. Delci se gibljejo z različno hitrostjo pod centrifugalno silo na podlagi njihove gostote. Dejanska hitrost sedimentacije je odvisna predvsem od velikosti in mase delcev. Ker je gostota delcev višja od gradienta gostote, vsi delci proizvajajo pelete. Centrifugiranje z gradientom gostote je prikazano v slika 2.


Slika 2: Centrifugiranje z gradientom gostote

Izoprinska centrifugacija

Izopinično centrifugiranje se začne s homogeno raztopino. Pod centrifugalno silo se delci premikajo, dokler njihova gostota ni podobna gradientu gostote. Tako je izopiknsko centrifugiranje znano tudi kot plavajoče ali ravnotežno centrifugiranje. Biološki delci so odvisni od osmotskega tlaka gradienta gostote. Zato mora gradientni medij vsebovati podoben osmotski tlak kot celice ali organele.

Podobnosti med diferencialnim in gostoto gradientnim centrifugiranjem

  • Centrifugiranje z diferencialnim in gostotnim gradientom sta dve vrsti metod centrifugiranja.
  • Pri ločevanju delcev ali celic, ki temeljijo na njihovih fizikalnih lastnostih, sodelujejo tako diferencialno kot centrifugiranje z gradientom gostote.

Razlika med centrifugiranjem z diferencialnim in gostoto gradientom

Opredelitev

Diferencialno centrifugiranje: Diferencialno centrifugiranje se nanaša na metodo ločevanja, kjer so komponente celice ločene na podlagi njihove gostote v centrifugi glede na centrifugalno silo, ki jo doživljajo.

Centrifugiranje z gradientom gostote: Centrifugiranje z gostoto gradienta se nanaša na metodo ločevanja, kjer se snovi koncentrirajo v raztopinah cezijevih soli ali saharoze.

Ločevanje

Diferencialno centrifugiranje: Ločevanje poteka glede na velikost delcev v diferencialnem centrifugiranju.

Centrifugiranje z gradientom gostote: Ločevanje poteka na podlagi gostote delcev v centrifugaciji z gradientom gostote.

Vrste molekul

Diferencialno centrifugiranje: Diferencialno centrifugiranje se uporablja za ločevanje celic, organelov ali makromolekul.

Centrifugiranje z gradientom gostote: Centrifugiranje z gradientom gostote se uporablja za ločevanje molekul ali delcev.

Vrsta vzorca

Diferencialno centrifugiranje: Kot diferencialno centrifugiranje uporabimo homogeniziran organ.

Centrifugiranje z gradientom gostote: Kot vzorec uporabimo homogenizirano raztopino v centrifugaciji z gradientom gostote.

Rešitev za sladkor

Diferencialno centrifugiranje: V diferencialnem centrifugiranju se ne uporablja raztopina sladkorja.

Centrifugiranje z gradientom gostote: V centrifugiranju z gradientom gostote uporabimo saharozo ali katero koli raztopino sladkorja.

Enostavnost metode

Diferencialno centrifugiranje: Diferencialno centrifugiranje je enostavno za uporabo.

Centrifugiranje z gradientom gostote: Centrifugiranje z gradientom gostote je težko uporabiti.

Kontaminacija

Diferencialno centrifugiranje: Pri diferencialnem centrifugiranju ni kontaminacije.

Centrifugiranje z gradientom gostote: Nekatera kontaminacija je vedno možna pri centrifugiranju z gradientom gostote.

Zaključek

Centrifugiranje z diferencialnim in gostotnim gradientom sta dve metodi centrifugiranja, uporabljeni za ločevanje delcev. Diferencialno centrifugiranje ločuje delce glede na njihovo velikost. Vendar pa centrifugiranje z gradientom gostote ločuje delce. Glavna razlika med diferencialnim centrifugiranjem in centrifugiranjem z gradientom gostote je vrsta fizikalnih lastnosti, na kateri temelji vsak tip metode centrifugiranja.

Sklic:
1. "Razdelitev centrifugiranja".Sigma-Aldrich,